微量法

測(cè)定意義

*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷，土壤中*磷是限制植物生長主要因子之一。

測(cè)定原理

用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷，用鉬銻抗比色法測(cè)定。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液：液體 105mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 支，4℃避光保存。臨用前加 0.5mL 蒸餾水溶解。試劑二：液體 1mL×1 支，4℃保存。

工作液：臨用前將試劑一和試劑充分混勻，加 48.5mL 蒸餾水混勻。

樣本處理

新鮮土樣風(fēng)干，過20目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：20的比例（建議稱取約0.05g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g ，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。

測(cè)定操作表

	空白管	測(cè)定管
樣本（μL）		20
提取液（μL）	60	40
工作液（μL）	80	80
H2O（μL）	60	60
充分混勻，25℃靜置 30min
于微量石英比色皿/96 孔板中，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定 700nm 處吸光值 A，分別記為 A 空白管和 A 測(cè)定管，△A=A 測(cè)定管-A 空白管

計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.237x-0.2018，R2=0.9992

*磷含量（mg/kg）=（△A+0.2018）÷ 0.237×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）

= 42.19×（△A+0.2018）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g

b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1185x-0.2018，R2=0.9992

*磷含量（mg/kg）=（△A+0.2018）÷ 0.1185×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）

= 84.38×（△A+0.2018）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：

免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)	細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)	試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)	實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)	石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡	核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)	免疫共沉淀（CHIRP）實(shí)驗(yàn)
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀（RIP）實(shí)驗(yàn)代做	酶聯(lián)免疫（ELISA）技術(shù)服務(wù)	雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒	喹諾酮類快速檢測(cè)試劑盒
組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)	染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)	多因子液相芯片技術(shù)（Luminex）實(shí)驗(yàn)	免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)
ATP/ADP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)	蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)	蛋白相互作用分析	堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)	非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn) （Label-free）	DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)	端粒酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞生長曲線的測(cè)定	掃描電鏡服務(wù)	NF-KB p65活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)	慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)