91老司机精品视频_欧美日韩一区二区免费在线观看_91九色视频导航_日韩精品中文字_狠狠综合久久av一区二区小说_久99久在线视频_国产精品美女免费_国内揄拍国内精品少妇国语_91香蕉嫩草影院入口_亚洲一区久久久_成人国产精品av_日韩女优人人人人射在线视频_国产精品美女视频网站_亚洲国产成人av在线_激情懂色av一区av二区av_中文字幕亚洲一区二区三区五十路

當前位置:
首頁 > 技術文章 > HSC-3 人口腔鱗狀細胞癌細胞傳代/復蘇技巧
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
HSC-3 人口腔鱗狀細胞癌細胞傳代/復蘇技巧
點擊次數:516 更新時間:2024-03-14

HSC-3 人口腔鱗狀細胞癌細胞

,HSC3

貨號:YJ- h438(STR鑒定)

價格: 2500.0

規格: 1*106 

細胞介紹

HSC-3 細胞系是從一名 63 歲男性患者的舌鱗狀細胞癌起源的轉移性淋巴結腫瘤中建立的。從新鮮的外植腫瘤組織中收集遷移和增殖的上皮細胞并進行傳代培養,大多數報告表明,皮下接種到裸鼠體內的人上皮腫瘤轉移是相當罕見的。HSC-3 是一種人類口腔鱗狀癌細胞系,當皮下移植到裸鼠體內時,它會在引流淋巴結中形成轉移灶。來自 HSC-3 的條件培養基已顯示可促進血管生成,HSC-3 細胞具有顯著升高的生長因子分泌水平。該細胞系的高度侵襲性特征使 HSC-3 成為研究轉移性鱗狀細胞癌的高引用模型。

細胞特性

1 來源:63歲(男)鱗狀細胞癌,舌頭

2 形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3 含量:>1x10^6  細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                      

一.培養基及培養凍存條件準備

1 準備MEM(推薦YJ-0012)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理

1 凍存細胞的復蘇

1) 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

 

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

5.客戶在細胞培養過程中,有技術問題可以聯系技術售后我們給予解答。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

 

實驗技術服務:

 


滬公網安備 31011802001676號

91老司机精品视频_欧美日韩一区二区免费在线观看_91九色视频导航_日韩精品中文字_狠狠综合久久av一区二区小说_久99久在线视频_国产精品美女免费_国内揄拍国内精品少妇国语_91香蕉嫩草影院入口_亚洲一区久久久_成人国产精品av_日韩女优人人人人射在线视频_国产精品美女视频网站_亚洲国产成人av在线_激情懂色av一区av二区av_中文字幕亚洲一区二区三区五十路
日韩欧美国产激情| 欧美日韩加勒比精品一区| 久久99久久99精品免观看粉嫩| 国产精品高潮粉嫩av| 欧美在线亚洲在线| 国产91精品最新在线播放| 欧美亚洲国产日本| 精品福利在线观看| 亚洲一区二区三区乱码aⅴ蜜桃女| 亚洲精品一区二三区不卡| 亚洲综合成人婷婷小说| 国产欧美一区二区三区在线看| 亚洲国产精品成人av| 日韩av大片免费看| 中文字幕在线观看亚洲| 亚洲电影免费观看高清完整版| 久久综合免费视频| 国产欧美一区二区白浆黑人| 九九热精品在线| 国产成人精品视频在线| 成人av色在线观看| 日韩精品中文字幕久久臀| 97国产精品免费视频| 欧美成人午夜剧场免费观看| 国产精品视频免费在线| 日韩精品在线观看网站| 亚洲免费av电影| 亚洲精品少妇网址| 国产精品视频网| 日韩美女主播视频| 欧美制服第一页| 在线免费看av不卡| 国外色69视频在线观看| 国产一区二区三区在线播放免费观看| 在线视频亚洲欧美| 国语自产在线不卡| 欧美成人免费全部观看天天性色| 午夜美女久久久久爽久久| 中文字幕日韩欧美在线视频| 成人av资源在线播放| 亚洲精品一区二区在线| 欧美专区福利在线| 亚洲乱码av中文一区二区| 中文字幕欧美日韩在线| 中文字幕日韩精品在线观看| 日韩亚洲国产中文字幕| 亚洲天堂av在线免费| 日韩大胆人体377p| 亚洲欧美在线免费| 亚洲国产古装精品网站| 欧美综合一区第一页| 久久亚洲春色中文字幕| 91精品视频专区| 日韩欧美精品免费在线| 国产精品久久久久久亚洲调教| 91精品国产成人www| 日本三级韩国三级久久| 91国产高清在线| 欧美中文字幕在线| 日韩电影大全免费观看2023年上| 青青草国产精品一区二区| 亚洲欧美视频在线| 久久久久久久久久亚洲| 亚洲视频在线免费观看| 狠狠躁夜夜躁人人躁婷婷91| 国产一区二区三区在线观看视频| 欧美wwwxxxx| 欧美成人免费网| 日韩中文有码在线视频| 亚洲成人免费在线视频| 最近中文字幕2019免费| 亚洲欧美色图片| 国产精品美女久久久久av超清| 精品久久久久久久久久久久| 日韩在线视频中文字幕| 欧美中文字幕在线视频| 国产精品av电影| 中文字幕国产亚洲| 爱福利视频一区| 亚洲最新在线视频| 日韩精品视频免费专区在线播放| 国产欧美一区二区| 91高清免费在线观看| 国产精品久在线观看| 久久久精品视频成人| 精品美女永久免费视频| 精品久久中文字幕久久av| 日本aⅴ大伊香蕉精品视频| 欧美福利视频在线| 日本91av在线播放| 国产成人精品电影| 久热精品视频在线免费观看| 欧美日韩国产色视频| 国产视频精品一区二区三区| 久久久久久伊人| 亚洲综合色av| 亚洲国产精品va在线| 91av在线免费观看| 欧美性做爰毛片| 国产精品自产拍在线观看| 欧美成人三级视频网站| 亚洲福利视频专区| 伊人亚洲福利一区二区三区| 伊人久久久久久久久久久久久| 亚洲国产精品中文| 亚洲成人性视频| 草民午夜欧美限制a级福利片| 亚洲欧美色婷婷| xxx成人少妇69| 久久精品中文字幕免费mv| 国产精品夫妻激情| 亚洲第一视频在线观看| 欧洲成人在线观看| 国产精品手机播放| 国产精品久久久久久久久久新婚| 韩国一区二区电影| 欧美日韩国产精品专区| 久久久久久久久久久av| 国产美女主播一区| 国产精品一区=区| 欧美日韩亚洲激情| 精品中文字幕在线2019| 日韩中文字幕在线播放| 国产精品国产三级国产aⅴ9色| 久久精品视频亚洲| 欧美疯狂做受xxxx高潮| 一本色道久久88综合日韩精品| 91av视频在线| 欧美在线视频免费播放| 欧美在线精品免播放器视频| 7m精品福利视频导航| 日韩av第一页| 亚洲毛片在线观看| 欧美激情一级精品国产| 亚洲精品aⅴ中文字幕乱码| 精品性高朝久久久久久久| 成年无码av片在线| 中文字幕亚洲色图| 日韩欧美在线视频免费观看| 国产z一区二区三区| 日韩精品小视频| 久久伊人91精品综合网站| 九九热最新视频//这里只有精品| 欧美亚洲另类制服自拍| 国产97在线播放| 国产亚洲精品久久久| 亚洲成人免费在线视频| 91精品一区二区| 91丨九色丨国产在线| xxxxxxxxx欧美| 亚洲色图五月天| 日本精品视频在线播放| 亚洲在线观看视频网站| 久久99久国产精品黄毛片入口| 青草青草久热精品视频在线观看| 国产日韩欧美夫妻视频在线观看| 亚洲欧美制服丝袜| 成人激情在线播放| 日韩高清电影好看的电视剧电影| 一区二区在线视频播放| 亚洲第一在线视频| 欧美性xxxxx| 亚洲精品成人免费| 最近2019年日本中文免费字幕|